血小板生成素（TPO）是巨核細(xì)胞生成的主要細(xì)胞因子調(diào)節(jié)因子，通過其特異性細(xì)胞 表面受體 MPL 起作用。缺乏 TPO 或 MPL 的小鼠在穩(wěn)態(tài)下產(chǎn)生約 10% 的正常巨核細(xì)胞和 血小板，并且在骨髓（BM）移植或細(xì)胞毒性藥物等應(yīng)激下血小板的恢復(fù)減弱。MPL 信號 轉(zhuǎn)導(dǎo)在維持正常的造血干細(xì)胞（HSC）數(shù)量和活動方面也起著重要作用。除了刺激巨核生 成外，TPO 還可以單獨(dú)或與其他細(xì)胞因子（包括 GM-CSF、IL3、IL6、IL11、SCF、FLT 配 體、FGF 和 EPO）聯(lián)合支持造血干細(xì)胞和 MK 祖細(xì)胞的存活和擴(kuò)增。

      TPO 與其特異性受體 Mpl（TPOR）蛋白結(jié)合，觸發(fā) Jak2 的激活和受體的磷酸化， Tpo/Mpl 激活的主要信號級聯(lián)反應(yīng)包括 JAK/STAT、PI3K-Akt 和 Ras-MAPK1/3 通路。

      32D（小鼠原 B 細(xì)胞）的生長和增殖需要 IL-3 的維持。通過引入各種表達(dá)激酶的基因， 能作為 32D 的驅(qū)動基因，讓 32D 不再依賴 IL-3 而增殖，進(jìn)而激酶基因成為 32D 增殖依賴 的驅(qū)動基因，用于評估小分子藥物對激酶的靶向抑制作用，原理及流程見下圖所示。


 

Figure 1. TPOR(Ligand Dependent) 32D 細(xì)胞模型原理圖