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c-Kit D816V/BaF3

CBP73206

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I. Background

      c-Kit 基因位于人類染色體 4q12-13 區(qū)域,屬于原癌基因,編碼Ⅲ型酪氨酸激酶受體 CD117,其配體為干細胞因子(SCF)。該基因通過激活 PI3K、MAPK、JAK-STAT 等信 號通路,調控細胞增殖、分化、存活及凋亡,在造血干細胞、黑色素細胞、生殖細胞等發(fā) 育中起關鍵作用,并參與胚胎發(fā)育、配子形成及免疫細胞功能。

      c-Kit 異常激活與多種腫瘤相關,如 80%的胃腸道間質瘤(GIST)存在 c-Kit 突變,常 見于 11 號外顯子(如 K642E 突變),導致受體持續(xù)活化,促進腫瘤生長;此外,急性髓 系白血病、黑色素瘤、肥大細胞增生癥等也可見其突變。靶向藥物如伊馬替尼可抑制異常 c-Kit 活性,改善患者預后,尤其在 GIST 中療效顯著。

      在正常生理中,c-Kit 還參與維持組織干細胞功能及生育能力。其功能缺失突變則可能 引發(fā)斑駁癥等遺傳性疾病。當前,c-Kit 仍是癌癥靶向治療的重要靶點,相關藥物研發(fā)持續(xù) 推進,以優(yōu)化療效并克服耐藥性。

 
II. Description

      BaF3(小鼠原 B 細胞)的生長和增殖需要 IL-3 的維持。通過引入各種表達激酶的基因, 能作為 BaF3 的驅動基因,讓 BaF3 不再依賴 IL-3 而增殖,進而激酶基因成為 BaF3 增殖依 賴的驅動基因,用于評估小分子藥物對激酶的靶向抑制作用,原理及流程見下圖所示。
 



Figure 1. 
c-Kit[D816V] BaF3 細胞的構建原理圖

 
III. Introduction
Cell Line Name: c-Kit D816V/BaF3
Host Cell: Ba/F3
Stability: 16 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Application: Anti-proliferation assay and PD assay
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Complete Culture Medium: RPMI-1640+10%FBS
Mycoplasma Status: Negative
 
IV. Representative Data

1.WB of  c-Kit D816V/BaF3


Figure 2. WB of 
c-Kit D816V/BaF3


2. Sanger of c-Kit D816V/BaF3



Figure 3. Sanger of c-Kit D816V/BaF3


3. Anti-proliferation assay

Figure 4. CTG Proliferation Assay of  c-Kit [D816V] BaF3 (C1).

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